《植物生理学报》 2009, 45(1): 63-66

分光光度法测定叶绿素含量及其比值问题的探讨

袁方, 李鑫, 余君萍, 王学奎*, 徐久玮, 张立新

华中农业大学植物科技学院中心实验室, 作物生理与栽培研究中心, 武汉, 430070

通信作者：王学奎；E-mail: wang-xuekui@mail.hzau.edu.cn；Tel: 027-87282130

摘　要：

本文以水稻、棉花、玉米以及喜荫植物吉祥草为材料, 采用分光光度法比较了不同性能的分光光度计对叶绿素含量 及其比值测定的影响。结果表明, 狭缝宽度过小或过大均导致叶绿素定量结果的相对误差增大, 但仪器的波长偏移是引起 测定结果误差的主要原因。波长偏差超过1 nm时会影响混合溶液中叶绿素b的定量结果以及叶绿素的相对比值(Chl a/Chl b), 波长 “ 蓝移 ” 引起 Chl a/Chl b 偏高, 波长 “ 红移 ” 则导致 Chl a/Chl b 偏低。波长偏移及波长重现性差是造成 Chl a/Chl b 比 值偏离其“ 理论比值”、导致测定数据之间缺少可比性的原因。选择具有波长自动校准功能、波长精度高、狭缝宽度在1~2 nm 的分光光度计用于叶绿素含量及其比值的测定则可获得可比性强、重现性好、准确度高的结果。

关键词：分光光度法; 叶绿素含量; 叶绿素比值

收稿：2008-09-08   修定：2008-12-04

资助：大学生科技创新项目和湖北省高等学校教学研究项目(20040144)。

Methodological Study on Determination of Chlorophyll Contents and Ratio of Chl a/Chl b by Spectrophotometry

YUAN Fang, LI Xin, YU Jun-Ping, WANG Xue-Kui*, XU Jiu-Wei, ZHANG Li-Xin

Crop Physiology and Production Center, Central Laboratory of College of Plant Science & Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China

Corresponding author: WANG Xue-Kui; E-mail: wang-xuekui@mail.hzau.edu.cn; Tel: 027-87282130

Abstract:

本文以水稻、棉花、玉米以及喜荫植物吉祥草为材料, 采用分光光度法比较了不同性能的分光光度计对叶绿素含量 及其比值测定的影响。结果表明, 狭缝宽度过小或过大均导致叶绿素定量结果的相对误差增大, 但仪器的波长偏移是引起 测定结果误差的主要原因。波长偏差超过1 nm时会影响混合溶液中叶绿素b的定量结果以及叶绿素的相对比值(Chl a/Chl b), 波长 “ 蓝移 ” 引起 Chl a/Chl b 偏高, 波长 “ 红移 ” 则导致 Chl a/Chl b 偏低。波长偏移及波长重现性差是造成 Chl a/Chl b 比 值偏离其“ 理论比值”、导致测定数据之间缺少可比性的原因。选择具有波长自动校准功能、波长精度高、狭缝宽度在1~2 nm 的分光光度计用于叶绿素含量及其比值的测定则可获得可比性强、重现性好、准确度高的结果。

Key words: 分光光度法; 叶绿素含量; 叶绿素比值